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试管婴儿高黄体酮水平对子宫内膜容受性的影响

    据报道,在试管婴儿(IVF)和胚胎移植(ET)周期的20%-40%时,血清黄体酮(P)在人类绒毛膜促性腺激素(hCG) (hCG)发生升高。我们的临床研究表明,hCG日血清P为>6.0 nmol/l,妊娠结局更差(13.79,44.68%)。然而,这些细微的增加对植入的潜在影响仍然有争议。一些人认为高血清黄体酮浓度可能对卵母细胞质量或子宫内膜条件有不利影响。
 

    最近的临床研究支持子宫内膜容受性降低的观点。研究人员在卵母细胞采集周期(每个妇女2个周期,一个正常周期和另一个黄体酮升高周期)中对患者进行了实验。无论黄体酮是否升高,接受移植的患者每次试管婴儿胚胎移植的妊娠率都是相似的。临床研究表明,黄体酮升高的患者新鲜ET周期的预后较差,但与正常黄体酮组相比,冷冻胚胎移植(FET)周期的成功预后相似。这些报告进一步证实了妊娠率低与P升高患者子宫内膜容受性降低之间的联系,而非受精或胚胎质量。
 
    子宫内膜容受性是一个复杂的过程,在时间和空间上都受到限制。改善子宫内膜容受性和胚胎制备应能提高妊娠率,减少早期妊娠失败。一般认为人类月经周期的接受窗口期限制在19-24天,排卵后8-10天。子宫内膜容受性已被广泛研究,许多子宫内膜容受性的生化标志物已经被提出,包括整合素和白血病抑制因子(LIF),尽管没有一个生物标志物被证明是临床有用的指标。事实上,很多因素都能影响子宫内膜容受性,这使得我们很难清楚地了解子宫内膜中的基因调控。是否有与高黄体酮水平相关的子宫内膜感受性的标记物?
 
    近年来,互补DNA (cDNA)和寡核苷酸芯片技术均已成功应用于子宫内膜基因表达的研究。这项技术的可用性使得从全球基因组学角度研究子宫内膜接受过程成为可能。mirna是在动植物细胞中发现的小(约22 nt)核糖核苷酸,通过调控基因表达和蛋白翻译在细胞分化、组织发育和凋亡中发挥重要作用。因此,目前的研究试图通过比较正常和升高的P型子宫内膜的整体基因表达模式来识别与子宫内膜接受能力发展相关的miRNAa-和mrna。在子宫内膜容受性中,mirna与靶mrna之间复杂关系的表征可能有助于确定影响容受性的分子通路;然而,仅通过mRNA基因表达分析并不能完全阐明这一点。采用miRNA和microarray检测影响P升高患者不良接受度的主要因素。
 
    这项研究的目的是探讨高黄体酮水平对子宫内膜容受性的影响。
 
    方法
 
    这是在北京大学第三医院生殖医学中心进行的前瞻性分析。所有患者均在同一周期内接受试管婴儿治疗并取消胚胎移植,分为1组(正常P;7例,2组(P升高;12名患者)。子宫内膜活检在卵母细胞取出6天后进行。采用V4.0 miRNA探针和22k人类基因组阵列对子宫内膜活检中整体miRNA和mRNA基因表达进行研究。得到了两组间的折叠比,以比较两组间的基因调控。选择Spp1和Ang基因表达,RT-PCR验证芯片结果,免疫组化法检测骨桥蛋白和VEGF蛋白表达。
 
    结果显示,在microRNA和微阵列芯片上,有4个miRNA(均为下调)和22个mRNA(13个上调,9个下调)表达差异。RT-PCR中的miRNA-451、Spp1和Ang表达验证了阵列结果。骨桥蛋白和VEGF在子宫内膜中也有阳性表达。
 
    所以,来自microRNA和微阵列分析的数据表明,hCG日高黄体酮、骨桥蛋白升高、VEGF降低的患者子宫内膜容受性不同,妊娠率较低。

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